Makro fotoğrafçılıkta, odak uzaklığı konunun "çalışma mesafesi"ni belirler. Odak uzaklığı ne kadar uzun olursa, 1:1 büyütme oranı elde etmek için çalışma mesafesi o kadar büyük olur. Bu nedenle, uzun odak uzaklığına sahip bir makro lens, canlı konuları yakın planlarda fotoğraflamak için idealdir. Örneğin, 100mm'lik bir makro lens kullanırken, 50mm'lik bir makroya kıyasla konudan iki kat daha uzakta durmanız gerekebilir.
Makro fotoğrafçılığındaki bir başka zorluk ise nesne üzerindeki ortam ışığını engelleme olasılığıdır. Ancak daha geniş mesafelerde çalışırken, bu sorunla karşılaşma olasılığınız azalır.
Makro lenslerin farklı odak uzaklıkları vardır ve 1:1 büyütme oranı için farklı çalışma mesafeleri gerektirirler. Normal bir makro lens (50mm), 18-20 cm mesafede 1:1 büyütme oranı sağlar. Kısa tele bir makro lens (100mm), 30 cm mesafede, tele bir makro lens (200mm) ise 50 cm mesafede aynı büyütme oranını sağlar. Nesneye daha yakından çekim yapmak perspektifi genişletirken, daha uzaktan çekim yapmak ise nesneyi sıkıştırabilir ve farklı bir etki yaratabilir. Bu nedenle, makro fotoğrafçılığında kullanılan lens seçimi, fotoğrafçının hedeflediği etkiyi yaratmak için önemlidir.